GENERACIÓN DE UNA BASE DE DATOS DE MADURACIÓN MIELOIDE POR CITOMETRÍA DE FLUJO MULTIPARAMÉTRICA

Introducción

La Leucemia Mieloblástica Aguda (LMA) es la leucemia aguda más frecuente en adultos. El estudio de la Enfermedad Residual Medible (ERM) por citometría de flujo multiparamétrica (CFM) ha ganado gran relevancia en el seguimiento de los pacientes con implicancias pronósticas y terapéuticas. El proyecto: Enfermedad residual medible en Leucemia Aguda Mieloblástica por citometría de flujo como factor predictor y pronóstico de recaída: desarrollo de una nueva estrategia diagnóstica e incorporación de análisis automático mediante citometría computacional, tiene como objetivo desarrollar una nueva estrategia para medición de ERM mediante CFM, combinando: determinación de inmunofenotipo asociado a leucemia, estrategia "different from normal" y búsqueda de células madre leucémicas (leukemic stem cells). Esto requiere una base de datos de médulas óseas (MO) control para establecer el patrón "normal" o de referencia. Presentamos en esta instancia los resultados de la evaluación de MO control y generación de una base de datos en el LCBM.

Materiales y Métodos

Esta constituye la fase 1 del proyecto total.

Se estudiaron muestras de MO de controles (pacientes cirugía cardíaca) extraídas por aspiración al momento de esternotomía siguiendo el siguiente esquema:

1. Procesamiento de muestra:

   • Recuento celular automatizado

   • Bulk lysis

   • Marcación (Tubos M1, M2, M3 Euroflow + LSC)

2. Adquisición por Cito y análisis:

   • Adquisición 5.000.000 de eventos (FACS Canto II)

   • Estrategias de compensación habituales

   • Análisis individual por medio de software Infinicyt

3. Generación de base de datos:

   • Combinación datos obtenidos para generación de base de datos control

Conclusión

Hemos logrado completar el primer hito del proyecto mediante el estudio por CFM de MO de controles. Este estudio generó nuevo conocimiento que servirá como base para el desarrollo de las siguientes etapas del proyecto, así como también como insumo para futuras investigaciones.